【出 处】：

【作 者】： 李浏 [1,2] ; 宋浩 [2] ; 钟梁 [2] ; 阳小群 [2] ; 蒋开铃 [2] ; 杨蓉 [2] ; 刘北忠 [1,2]

【摘 要】目的构建携带PML（ΔNLS）基因的重组慢病毒,研究其对NB4细胞中c-Myc蛋白表达的影响。方法以质粒p CMV-HA-PML（ΔNLS）为模板,PCR扩增PML（ΔNLS）基因,克隆入慢病毒载体LV5-EF1a-GFP/puro,与pHelper 1.0和pHelper 2.0共转染293T细胞,包装病毒。收取病毒上清液,纯化后感染NB4细胞,荧光倒置显微镜观察感染效率,RT-PCR法检测PML（ΔNLS）mRNA的转录水平,Western blot检测PML（ΔNLS）、β-catenin、γ-catenin和c-Myc蛋白表达的变化。CCK-8实验观察细胞增殖。结果成功构建PML（ΔNLS）过表达慢病毒,病毒感染NB4细胞,感染效率达82.74%,LV5-PML（ΔNLS）携带的PML（ΔNLS）能够在NB4细胞中稳定表达;感染LV5-PML（ΔNLS）的NB4细胞中β-catnin、γ-catenin和c-Myc蛋白表达下降（P〈0.05）;NB4细胞增殖活力明显高于未感染组和空病毒载体组（P〈0.05）。结论成功构建了重组慢病毒PML（ΔNLS）,PML（ΔNLS）过表达可促进NB4细胞体外增殖,并抑制c-Myc蛋白表达。