【出 处】：

【作 者】： 景鹏伟 ; 胡文煦 ; 宋小英 ; 张岩岩 ; 贾道勇 ; 王亚平 ; 王璐

【摘 要】目的研究衰老骨髓基质细胞对骨髓造血细胞增殖分化能力的影响,为阐述机体造血微环境衰老对造血干/祖细胞增殖的影响提供实验依据。方法全骨髓贴壁法体外培养大鼠骨髓基质细胞,分为对照组和衰老组。衰老组：常规培养基内加入30 mg/mL D-半乳糖作用48 h。CCK-8法测定BMSCs增殖;流式细胞术分析细胞周期;β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色观察衰老BMSCs百分率;Western blot检测P16、P21和P53蛋白表达。骨髓造血细胞与BMSCs共培养,集落计数检测髓系多向性造血祖细胞（CFU-Mix）增殖分化。ELISA检测BMSCs培养上清液中IL-1β、GM-CSF和SCF含量;DCFH-DA流式荧光检测BMSC活性氧簇（ROS）水平;酶学法检测BMSCs内过氧化物丙二醛（MDA）含量和总超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果与对照组相比,D-半乳糖诱导BMSCs衰老,细胞阻滞于G0/G1期（P〈0.01）,增殖能力显著下降,SA-β-Gal染色阳性率升高（P〈0.01）;衰老相关蛋白P16、P21和P53表达明显上调（P〈0.01）。与衰老BMSCs共培养的骨髓造血细胞增殖分化能力减弱。衰老BMSCs内ROS、MDA氧化损伤指标上升,SOD抗氧化指标下降（P〈0.01）;BMSCs培养上清液IL-1β、GM-CSF和SCF含量明显下降（P〈0.01）。结论衰老骨髓基质细胞抑制造血细胞增殖、分化能力,其机制可能与骨髓基质细胞氧化损伤,分泌活性因子改变有关。