反转录病毒载体介导的P27^kip1促HepG2细胞凋亡
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【摘 要】目的研究反转录病毒介导的P27^kip1基因过表达对HepG2细胞的影响。方法构建携带有人P27^kip1 基因的反转录病毒载体,经脂质体介导转染PA317包装细胞,G418筛选获得稳定产毒细胞系,病毒感染HepG2细胞,筛选出P27^kip1 阳性克隆,Westernblot检测P27^kip1 在HepG2中的表达,并通过细胞形态学观察、MTT、FCW等方法,检测P27^kip1 对HepG2细胞的影响。结果成功构建了含有人P27^kip1 基因的pLNCX—P27反转录病毒载体并导入包装细胞获得了稳定产毒细胞系,病毒感染HepG2后P27^kip1基因可在细胞内高表达,过表达P27^kip1基因的细胞生长速度受阻,较多细胞阻滞于G1期,且凋亡增多。结论构建的pLNCX-P27载体能稳定高效地将P27^kip1基因导人HepG2细胞,过表达P27^kip1可抑制细胞生长,加速凋亡。