SiRNA沉默JAB1表达抑制肝癌细胞增殖
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【作 者】:
【摘 要】目的观察沉默JAB1基因表达对人肝癌细胞HepG-2增殖的影响。方法利用RNA干扰技术构建pAVU6-JAB1 siRNA干扰质粒,将其转染HepG-2细胞,采用real-time PCR、Western blot等方法对JAB1表达进行检测,WST-8、流式细胞分析对细胞增殖的影响。结果成功构建pAVU6-JAB1 siRNA干扰质粒,转染HepG-2细胞后JAB1蛋白表达量较对照组明显降低,P27kip1蛋白表达量明显升高(P〈0.01)。转染96 h后能显著抑制细胞增殖活性,由空载体转染组的99.6%±1.4%降至70.8%±1.6%。结论构建靶向JAB1基因的干扰质粒能下调JAB1基因的表达,上调P27kip1蛋白水平,并抑制HepG-2细胞在体外的增殖活性。